蚯蚓急性毒性试验是在人工土壤中按等比加入供试物水溶液并拌匀，引入蚯蚓，培养，第7天和第14天观察，统计死亡数，计算LC₅₀。审查要点如下：

设置上限浓度100 mg a.i./kg干土，若未见蚯蚓死亡，则无需继续进行试验。

剂量按一定级差设置5-7个浓度组。

对照组和每个处理组均设3个重复，每个重复10条蚯蚓。

将标本瓶置于20℃±2℃、湿度70％~90％、光照强度400 Lux～800 Lux的培养箱中。

试验历时两周，于第7d和第14d倒出瓶内土壤，观察记录蚯蚓的中毒症状和死亡数（用针轻触蚯蚓尾部，蚯蚓无反应则为死亡），及时清除死蚯蚓。

参比物质试验中氯乙酰胺对蚯蚓14d LC₅₀应在20mg a.i./kg干土～80 mga.i./kg干土之间。

试验报告中应包括：1）供试物信息；2）供试生物的名称、来源、大小及健康情况；3）试验条件，包括试验温度、光照等；4）供试土壤中的供试物浓度和试验开始后7d和14d的LC₅₀值和95%置信限，并给出所采用的计算方法；5）对照组的蚯蚓死亡率、行为反应异常的比例；6）注明人工土壤配方与配制方法。

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