通过大型溞在不同浓度的农药原药或制剂的溶液中暴露48h，观察试验中大型溞的中毒症状与活动抑制情况，求出大型溞48h的EC50值及95%置信限，评估该农药原药/制剂对于环境安全的影响。以下是溞类急性活动抑制试验中的几点注意事项：

1、对于试验中不稳定的农药，根据供试物在试验系统中不稳定的影响因素，参考NY/T 3273《难处理农药水生生物毒性试验指南》，以及OECD GD 23 采取相应措施仍不稳定的，应采用半静态法或流水式方法开展试验。

2、对于易挥发的供试物，在试验药液制备和暴露过程中，应选择密闭容器并尽量减小顶空体积。不同浓度的试验药液宜单独配制。无法分析暴露浓度时，应使用顶空体积为0 的系统。

3、采用易光解的供试农药开展大型罹急性活动抑制试验时，可在黑暗环境下或者用红光光源来进行试验，也可选择性地剔除造成光解的特定波长的光线。

4、对于易生物降解的供试农药，应采用半静态试验或流水式试验方法。开展半静态试验时，在试验开始时和试验期间，可对试验容器进行灭菌处理；开展流水式试验时，高浓度储备液宜在氮气中保存。试验过程中应避免使用抗生素，如必须使用，需增加抗生素对照组。

5、于疏水性的供试农药，试验过程中可采取以下措施维持暴露浓度，包括：采用半静态试验和流水式试验方法并适当增加试验药液更换频率；控制试验液中溶解的有机碳总量不高于 2 mg/L；保持试验体系表面过饱和等。

6、对于易被吸附的供试农药，当供试物暴露浓度<1 mg/L 时，可采用以下方法减少供试物在暴露系统表面和有机物上的吸附，包括：减小试验药液表面积与体积的比值、采用半静态试验和流水式试验方法并适当增加试验药液更换频率、采用非吸附性材料制作的试验容器（如聚四氟乙烯，避免使用橡胶和聚乙烯等高吸附性材料)、对试验容器进行预饱和处理（预饱和药液浓度不能超过正式试验浓度)、控制试验液中溶解的有机碳浓度不超过 2 mg/L 等。

7、在试验开始和结束时（如为半静态试验，还应包括每次更换试验液前后)，至少测定对照组和最高浓度处理组的温度、溶解氧含量、pH。建议再试验期间对水温进行持续检测。

8、判断大型潘活动受抑制的标准是：受试大型潘不动(即不能游动)，或轻晃试验容器，15s 内未观察到受试生物附肢或后腹部活动。

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